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Ver abaixo…
Explicação:
Enzimas de restrição cortadas em sequências específicas, de modo que a mesma enzima de restrição deve ser usada porque produzirá fragmentos com as mesmas extremidades coesivas complementares, possibilitando a formação de ligações entre elas.
Existem certos sites de restrição compatíveis que podem ser usados juntos. Xho1 e Sal1 são exemplos. Suas extremidades pegajosas combinam, e assim elas podem ser ligadas juntas. Mas a ligação mata ambos os sítios Xho1 e Sal1, então você não pode usar nenhum destes para cortar novamente (nos locais de ligação).
Você também pode usar exonuclease ou PCR para fazer as extremidades mais pegajosas (5
ou 3
overhangs) em sites contundentes - desta forma você pode ligar em um site sem corte - mas isso geralmente vai matar o site contundente, também.
O PBR322 é um plasmídeo que possui dois locais de restrição para o EcoRI, enquanto o DNA do fago T4 possui três sítios de restrição para o mesmo. Estes dois ADN foram tratados com EcoRI e deixados a correr em gel de agarose. Que tipo de padrão será obtido no gel?
Pergunta inválida, T4 tem cerca de 40 locais para EcoR1, não 3 ... pBR322 tem apenas 1 local para EcoR1, entre o gene do fator de resistência AMP e o gene TET ... T4 digests: (obrigado, Springer Verlag!) Mas, se a sua pergunta é mais hipotética: os genomas pBR322 e T4 são circulares, portanto: pBR322: 2cuts = 2 fragmentos, T4: 3cortes = 3 fragmentos. Correndo em gel de agarose você veria 2 bandas na pista de pBR, 3 bandas na pista de T4, A MENOS QUE 2 ou mais fragmentos fossem de tamanho igual ou próximo a eles. . Nesse caso, eles migram mais ou menos na mesma velocidade e serão
Por que você deve usar a mesma enzima de restrição na célula dna e no plasmídeo?
A endonuclease de restrição identifica e corta a mesma sequência palindrômica tanto no DNA quanto no vetor, pois quando eles serão misturados, suas bases complementares se unirão e formarão o r-DNA. Se ambos forem cortados com diferentes ER, então na mistura eles não ligam um com o outro como suas bases não combinam.
Você pode criar um site em 30 horas. Seu amigo pode criar o mesmo site em 20 horas. Quanto tempo levará para criar o site, se vocês dois trabalharem juntos?
12 horas Dica: Use o método unitário para melhor compreensão. Solução: em 30 horas, eu projeto 1 site. Então, em 1 hora, eu projeto 1/30 parte do site. Da mesma forma em 1 hora, meu amigo criaria 1/20 parte do site. Então, trabalhando juntos, em 1 hora, podemos projetar 1/30 + 1/20 = (2 + 3) / 60 = 5/60 = 1/12 parte do site. Agora 1/12 parte pode ser projetada em 1 hora. Portanto, um site pode ser projetado em (1) / (1/12) = 12 horas.