O que é cromatofocusing?

O que é cromatofocusing?
Anonim

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A cromatofocagem é uma técnica de separação de proteínas que permite a resolução de proteínas únicas e outros anfólitos a partir de uma mistura complexa de acordo com as diferenças nos seus pontos isoelétricos.

Explicação:

Esta técnica foi introduzida por Stuyterman e seus colegas entre 1977 e 1981. O cromatofocusing utiliza resinas de troca iônica e é tipicamente realizado em uma cromatografia líquida de proteína rápida.

Ele usa um empacotamento da coluna de troca iônica e um gradiente de pH gerado internamente que percorre a coluna como uma frente retida. A interação entre o gradiente de pH e substâncias anfóteros, como proteínas, faz com que essas substâncias saiam da coluna cromatográfica em locais característicos do efluente como bandas focalizadas.

Essa técnica de cromatografia de eluição de gradiente é uma poderosa ferramenta de purificação em relação a proteínas, pois pode resolver espécies muito semelhantes, diferindo pouco por limites de pH de 0,02, que podem não se separar bem usando estratégias tradicionais de troca iônica.