Como os cientistas isolam o DNA para estudá-lo?

Como os cientistas isolam o DNA para estudá-lo?
Anonim

Responda:

Existem alguns passos para fazer isso, por favor, ignore o meu mau Inglês, espero que você ainda possa entender o processo.

Explicação:

Isso não é tão difícil quanto você imagina.

Digamos que queremos isolar o DNA de um timo de bezerro, você precisa seguir estas instruções (elas são as mesmas para uma maçã, tanto quanto eu sei, mas há pequenas variações):

  1. Pegue 3 pedaços de 3 gramas e corte em pedaços minúsculos, o menor possível.

  2. Coloque no liquidificador, com 75 mL de citrato de sódio salino (SSC) por peça e verifique se a lâmina do liquidificador está completamente coberta em SSC, então adicione um pedaço de timo se for necessário.

    O SSC garante que as membranas celulares estão sendo dissolvidas.

    Continue misturando até que tudo esteja liso.

  3. Coloque-o em um tubo para a centrífuga e aplique-o em outro tubo para que a centrífuga não quebre

  4. Coloque o tubo na centrífuga por 20 minutos a 5000 rpm

  5. Quando você retirar os tubos da centrífuga, você deve ver dois componentes. O fundo tem uma substância sólida, isso é chamado de pellet e isso mantém os núcleos das células com o DNA. Você também verá uma substância líquida, que é chamada de sobrenadante e isso consiste no SSC com as membranas celulares dissolvidas.

  6. Despeje o sobrenadante em um movimento fluido, isso é chamado de decantação e isso deixa você com o pellet.

  7. Coloque uma pequena quantidade de NaCl 2,2 M no tubo com o pellet, de modo que o pellet fique coberto apenas de NaCl. NaCl faz com que as proteínas que envolvem o DNA se precipitem.

  8. Mexa com um tubo de ensaio vazio ou mexendo a vareta. Eventualmente você deve ter dois componentes. As proteínas no fundo e um líquido viscoso em cima disso.

  9. Retire o líquido viscoso com uma pipeta e certifique-se de não tomar nenhuma proteína com o fluido viscoso. (pedaços muito pequenos de proteína são muito difíceis de evitar, mas tente evitar tantas proteínas quanto possível)

  10. Coloque o líquido viscoso que você pipetou em um béquer e adicione 2x de etanol a ele. Mas adicione o etanol gentilmente porque você não quer misturá-lo com o DNA. Na interface entre o etanol e o fluido viscoso, você verá bolhas de DNA surgindo.

  11. Agitar suavemente com uma vareta de vidro, o DNA é carregado negativamente por isso deve ficar com a haste.

  12. Coloque-o em um tubo de ensaio e dissolva-o com SSC.

Uma máquina especial pode dizer quanto DNA você isolou e quão puro é.