O que é western blotting?

O que é western blotting?
Anonim

Responda:

É o uso de anticorpos para detectar proteínas que foram separadas por SDS-PAGE e depois transferidas para uma membrana.

Explicação:

As células contêm uma mistura de proteínas (muitos milhares) e estas podem ser separadas por SDS-PAGE.

As proteínas do SDS-PAGE são então transferidas, pelo uso de um campo elétrico, do gel para uma membrana tipicamente feita de nitrocelulose ou fluoreto de polivinilideno (PVDF).

A membrana é sondada com um anticorpo primário específico para a proteína de interesse. Um anticorpo secundário é então usado para detectar o anticorpo primário. O anticorpo secundário conterá um marcador que pode ser detectado por uma reação química para dar uma faixa visível na membrana ou um sinal que pode ser capturado por uma câmera especializada.

Se necessário, posso expandir essa resposta com grande profundidade, já que fiz várias centenas de manchas ocidentais durante minha carreira.